Skripsi ini bertujuan untuk: pertama, menguraikan selayang pandang tentang misteri transubstansiasi dalam Ekaristi Kudus. Kedua, menjelaskan tentang perjamuan Paskah menurut Injil Matius bab 26: 26-29. Ketiga, menghubungkan misteri transubstansiasi dalam Ekaristi Kudus dan perjamuan Paskah menurut Injil Matius bab 26: 26-29 dengan penjelasan teologis-biblis. Metode yang digunakan dalam penulisan skripsi ini adalah metode kepustakaan. Sumber utama dalam penulisan skripsi ini, yaitu kamus, Kitab Suci, dokumen Konsili Vatikan II, Konsili Trente, Katekismus Gereja Katolik, ensiklik- ensiklik, Kitab Hukum Kanonik, Pedoman Umum Misale Romawi, Tata Perayaan Ekaristi, buku-buku, jurnal, artikel, dan bahan kuliah yang berhubungan dengan tema judul skripsi. Sumber sekunder dari penulisan skripsi tersebut adalah internet. Teknik pengolahan data dalam skripsi ini berupa analisis data dari sumber utama dan sumber sekunder, kemudian ditafsir tanpa menghilangkan makna aslinya. Langkah-langkah yang digunakan dalam teknik analisa, yaitu (1) membaca sumber-sumber dan berusaha memahami, (2) membaca ulang sumber-sumber, merefleksikan, dan menafsirkannya kembali, serta (3) mencatat data-data dari berbagai sumber yang dianggap penting sesuai dengan judul yang dibahas. Berdasarkan hasil studi kepustakaan, disimpulkan bahwa transubstansiasi dalam Ekaristi Kudus merupakan sebuah perubahan misteri ilahi yang dipersoalkan sakralitas dan kebenarannya. Konsep misteri transubstansiasi merupakan mukjizat Ekaristi yang harus dipahami dan diimani sebagai tanda kehadiran Kristus dalam perayaan liturgi (Ekaristi Kudus). Misteri transubstansiasi dipahami secara tidak terpisah dengan perjamuan Paskah Yesus bersama para murid yang tercatat dalam Kitab Suci Perjanjian Baru, salah satunya Injil Matius Bab 26: 26-29. Persoalan tentang pemahaman terhadap misteri transubstansiasi dapat berpengaruh bagi penghayatan iman dan keterlibatan umat beriman dalam perayaan Ekaristi Kudus. Oleh karena itu, pembahasan secara teologis-biblis diperlukan agar dapat mengatasi persoalan tersebut. Pembahasan ini berkaitan dengan proses perubahan transubstansiasi yang menghadirkan Kristus dalam Ekaristi Kudus. Dengan demikian, pemahaman dan pengayatan iman yang benar terhadap misteri transubstansiasi dalam Ekaristi Kudus memantik keterlibatan umat beriman mengikuti serta menghidupi Ekaristi setiap hari.